أمين أحمد ثابت
الحوار المتمدن-العدد: 3798 - 2012 / 7 / 24 - 20:29
المحور:
الطب , والعلوم
طريقة الشرائح المستديمة
* أ - الأجهزة المستخدمة :
1- الميكروتوم : الشركة المصنعة : YL3-A - البلاد المصنعة : الصين
يتكون من أربعة أجزاء 1- عجلة الدوران
2- حامل القالب
3- السكين ( حامل السكين )
4- ساعة ضبط السمك
2)- الحاضنة نوعها الماني
3)- الميكرسكوب نوعه ياباني
ب - المحاليل المستخدمة : الفورمالين – سلسل من الكحولات المتصاعدة والمتنازلة الزيلول – شمع
البرافين سائل – صبغة الهيموتوكسلين Hx – صبغة الأيوسين
ج- طريقة العمل :
1)- عملية التثبيت
تؤخذ القطعة وتوضع في الفورمالين في علبه عليها رقم العينة
وإذا كان الورم كبير نقيس كم طول وعرض هذه القطعة أو الورم
2)- عملية الغسيل
تغسل العينة بالماء الجاري لإزالة المثبت الزائد .
3)- عملية نزع الماء
تمرر العينة في سلسلة متصاعدة من الكحولات إبتداءً من 75% ( لمدة ساعتين ) ثم كحول
تركيزه 80% 85% 90% 95% 98% المدة ( ساعة ونصف )
4)- عملية الترويق :.
تؤخذ العينة من الزيلول لمدة نصف ساعة
5)- عملية التشريب :
توضع العينة من الزيلول وتوضع في كاس ومن ثم يصب الشمع عليها وبعد ذلك توضع في الحاضنه عند درجة 50- 55 ( لمدة ساعتين ) ثم بعد ذلك يتم التخلص من الشمع الأول ويتم إضافة شمع أخر لمدة ساعة واحده لكي يتشرب الشمع إلى داخل النسيج .
6)- عملية الطمر :.
يتم وضع العينة في قالب ويصب الشمع عليه ثم يترك حتى يتصلب .
7)- عملية التقطيع :. نبدأ بتقطيع القالب الشمعي الذي يحتوي على العينة أو النسيج على شكل شريط بواسطة جهاز الميكروتوم أو ( المشراع الدقيق ) بحيث يكون سمك العينة المطلوب 5- 8 مايكرون .
8)- التحميل
بواسطة حمام مائي درجة حرارته 40 أو 37 يتم وضع الأشرطة التي تحتوي على قطاعات النسيج أوالعينة في إناء أخر يوجد داخل الحمام المائي وذلك لفرد الشمع وبالتالي فرد النسيج لمدة 5 دقائق . ثم تأتي مرحلة تحميل النسيج على الشريحة ويتم إلصاق النسيج على الشريحة بواسطة مسح الشريحة بزلال البيض + جلسرين وتترك بعد ذلك الشريحة لمدة أسبوع أو تستخدم مباشره .
9)- إزالة الشمع
يتم إزالة الشمع بوضع الشريحة على سخان .
10)- عملية الترويق :.
تروق الشرائح بواسطة الزيلول 5-10 دقائق وذلك لجعل النسيج شفاف .
11)- عملية إضافة الماء :.
يتم إضافة الماء بطريقة غير مباشره وذلك بوضع الشرائح الحاويه على النسيج في سلسلة متنازلة من الكحولات إبتداء من 98% إلى كحول تركيزه 80% لمدة دقيقه واحده في كل تركيز .
12)- أضف ماء مقطر للشرائح لمدة دقيقتين
13)- عملية الصباغة :.
تستخدم صبغتين أ) صبغة الهيماتوكسلين (Hx ) لصباغة النواه .
ب)- صبغة الأيوسين لصباغة السيتوبلازم
الخطوات :.
1)- نضع الشريحة في صبغة الهيماتوكسلين Hx لمدة 5 دقائق
2)- تغسل الشريحة بالماء المقطر لمدة 20 ثانية لإزالة الصبغة الزائدة
3)- نضع الشريحة في كحول التميز ( كحول + HCL ) للتخلص من الصبغة الزائدة في
الكحول ثم يتم غسل الشريحة بالماء العادي لمدة دقيقتين ( وسط قاعدي )
4)- نضع الشريحة في صبغة الأيوسين ( I ) لمدة دقيقتين أو للحظات
5)- نغسل الشريحة بالماء المقطر
6)- نضع الشريحة في سلسلة متصاعدة من الكحولات لنزع الماء لمدة دقيقتين في كل تركيز
7)- نضع الشريحة في الزيلول لمدة ربع ساعه
8)- نضع على الشريحة كندا بلسم ثم نضع الغطاء ( الكفر ) ثم تترك تجف
9)- بعد ذلك يتم الفحص تحت الميكروسكوب .
النسيج السليم للثدي
الغده اللبنيه الخامله : الغدد اللبنيه هي غدد حويصليه – انبوبيه متفرعه تنمو من البشره ثم تستقر على النسيج تحت الجلدي وتبداء بالنمو عند الإناث وقت البلوغ ولكنها لا تصل إلى الحالة الوظيفية الكاملة إلا بعد الحمل – وتنمو الغدد نوعاً ما لدرجه ضئيله عند الذكور أثناء البلوغ . غير أن النمو محدود وتبقى الغدد في حاله ثابته عادة .
يمثل شكل (1)مقطعا خلال غده خامله .النسيج الحشوي ضئيل ويتكون بشكل رئيسي من عناصر قنويه ونرى في مركز المجال أربع قنوات ( ق ) مقطوعه طوليا ويمكن رؤية تجويف صغير في كل منها يوجد فصل خامل إلى يمين القنوات وهو مبين تحت تكبير أعلى في شكل ( 2 ) .
تحاط العناصر الطلائيه لغده لبنيه خامله بنسيج رابط خلوي مفكك ( ن ر ك ) يميز بسهوله عن النسيج الرابط الأكثر تماسكاً ( ن ر م ) الموجود خارج مساحه الفصيص .
نلاحظ عدد النواه الكبير في النيج المفكك مقارنة بالعدد الأقل في النسيج الرابط المتماسك .
نلاحظ أيضا إحتواء النسيج الرابط المتماسك على الياف تبدو أكثر سمكاً . تحاط العناصر القنويه أيضاً بنسيج رابط ومفكك غير منتظم ولكن حدوده مع النسيج الرابط المتماسك غير واضحه كما هي الحال في الفصيصات وتوجد كميات متباينه من النسيج الدهني ( ن د ) في النسيج الرابط المتماسك .
تعد الخلايا الطلائيه ( ن ط ) ضمن الفصيص الخامل شكل ( 2 ) عناصر قنويه بالدرجه الرئيسه .
وفي طور الخمول يكون النسيج الطلائي بعمق خليتين ( مكعب طبقي ) (( الحويصلات )) غير موجوده غير أن أصلها متمثل بتثخنات خلويه بجدار القناه .
ً ً
الغده اللبنيه الخامله
ق قناه
ن د نسيج دهني
ن ر ك نسيج رابط مفكك
ن ر م نسيج رابط متماسك
ن ط نسيج طلائي
الأسهم براعم طلائيه
شكل ( 1 ) (إنسان ) X 65 . شكل ( 2 ) ( إنسان ) X 160 .
شكل ( 3 ) ( إنسان ) X 65 .
تبداء الغدد بالنمو أثناء فترة الحمل ويمكن إعتبار نموها عمليه مزدوجه حيث تنمو الغدد وتتفرع (تنبعج ) الحويصلات من الغدد ويمثل شكل ( 3 ) فصيصاً مع قناته في طور نمو مبكر وتظهر الغده الناميه عدة براعم طلائيه من القناه المتضخمه ( الأسهم ) وبالمقابل تظهر القناه الخامله
شكل ( 1 ) هياكل ملساء دون أي تفرع واضح أو علائم نمو ويكون النسيج الرابط المفكك أقل وضوحاً في الغدد الناميه .كما في الشكل ( 24-A )
الغده اللبنيه الناميه
في الوقت الذي يكون فيه نمو العناصر القنويه في الغده اللبنيه واضح المعالم أثنا مرحلة النموالمبكر يصبح نمو العناصر الحويصليه واضحاً في وقت متأخر بين شكل 1 عدة فصيصات ( ف ) في مرحله من النمو أكثر تقدماً من تلك المبينة في الشكل السابق حيث يمكن الأن تشخيص حويصلات متميزه ( ح و ) وترتبط هذه كلها بقناه ( ق ) رغم أن الإرتباطات لا ترى في المقطع ذي البعدين عادة
تفصل الفصيصات بواسطة حواجز ( ح ) من نسيج رابط متماسك وترى بعض القنوات وكأنها في موضع بين فصيصي وبالرغم أن النمو الحويصلي مازال جاري شكل 1 إلا أن بعض مناطق الغده لاتزال نسبياَ في مرحله مبكره من النمو .
فمثلا يظهر الجز ء المتضمن شكل I براعم طلائيه على طول القناه ( رؤؤس الأسهم ) .
يمثل شكل 2 تكبيراً أعلى لأحد الفصيصات حيث تتضح عدة حويصلات ( ح و ) تتكون الحويصلات
من طبقه واحده من نسيج طلائي مكعب .
وتوجد كميه قليله من راسب في تجويف بعض الحويصلات تمثل النشاط الإفرازي المبكر للخلايا.
الغده اللبنيه الناميه
ح حواجز
ح و حويصلات
ف فصيص
ق قناه
ن ر نسيج رابط
رؤوس الأسهم براعم طلائيه
الأسهم خلايا نسيج رابط دائريه
شكل 1 ( إنسان ) X 65 . ( الدائرة المتضمنه ) X 160 .
شكل 2 ( إنسان ) X 160 .
تظهر القناه الكبيرة ( ق ) التي تطرح فيها نواتج الحويصلات بشكل ساق على يسار الشكل ويمكن التعرف عليها بسبب موقعها ومنظرها الجانبي المستطيل . وتعود بعض النوى المسطحه والقريبة من النواه إلى خلايا – عضليه . يحوي النسيج الرابط ( ن ر ) المفكك الذي يحيط بالحويصلات اليافاً كولاجينيه رقيقه واعدادأ كبيره من الخلايا الكرويه ( الأسهم ) إن تشخيص هذه الخلايا صعب المنال تحت هذا التكبير . رغم أن معظمها قد يكون خلايا ليمفاويه .
الغده اللبنيه الفارزه
تتصف الغده اللبنيه الفارزه بوجود اعداد كبيره من الحويصلات شكل 1 ويظهر العديد من هذه كمساحات بيضويه أو كرويه وفي هذا الخصوص من السهل أن يشتبه بالغدة على أنها غده درقيه غير ان كل الحويصلات في الغده اللبنيه ترتبط بقناه وغالباً ما يرى الموضع الذي تفتح فيه عدة حويصلات إلى قناه مركزيه وتمثل هذه الإرتباطات فروع الجهاز القنوي النهائي أن وجود الحويصلات الرابطه ( النجوم ) تمكن الفرد من تشخيص الغده اللبنيه الفارزه ومن تميزها عن النسيج الدرقي حتى ولو كانت العناصر القنويه غير واضحه تشكل مقاطع الغدد اللبنيه عادة عناصر قنويه غير أن من الصعب تشخيص القنوات الصغيرة سيما وانها تشبه الحويصلات توجد في أعلى اليسار من الشكل قناه كبيره يمكن تمييزها بسهوله بسبب حجمها ويفصل عددحواجز نسيج رابط ( ح ) بين حويصلات الفصيصات المتجاوره وتوجد ضمن النسيج الرابط أوعيه دمويه كبيره ) ( و د ) .
الغده اللبنيه الفارزه
ح حاجز
ش شعيرات دمويه
ق قناه
و د أوعيه دمويه
النجوم تفرعات الجهاز القنوي النهائي
شكل 1 ( إنسان ) X 160 ، الشكلان 2,3 ( إنسان ) X 640 .
تتكون حويصلات الغدد اللبنية الفارزه من نسيج طلائي مكعب ويمكن عادة رؤيه بعض النواتج المترسبه ضمن تجويف الحويصله نرى عدة حويصلات في الشكلين 2,3 وتفصل كميه قليله من نسيج رابط بين الخلايا المكعبة للحويصلات المتجاوره ومن الممكن رؤية شعيرات دمويه ( ش ) في هذا النسيج الرابط .
يمثل شكل 3 تحضيراً خاصاً لبعض الدهون التي توجد في الإفراز اللبني حيث يظهر الدهن ككرات سوداء مختلفة الحجم ضمن التجويف الحويصلي وكذلك ضمن معظم الخلايا وعند تكوينه يظهر الدهن أولا كقطرات صغيره ضمن الخلايا ثم تكبر هذه القطرات لتطرح في التجويف الحوصلي أخيراً .
إن الأوعيه الليمفاويه للغدد اللبنيه ذات الأهميه السريريه لا ترى عادة في المقاطع النسيجيه .
النسيج المصاب بالسرطان
- إزدياد حجم الخليه إلى أضعاف حجم الخليه الطبيعيه .
وهذا ما نلاحظه من خلال الشكل 27-A
وكيف حدث لها إزدياد في الحجم بشكل كبير . LYPHOCYCES بحيث يوضح شكل الخلايا اليمفاوي
- كبر حجم النواه بشكل كبير مع إتخاذها من عدة أشكال مختلفه وغير منتظمه مثل الشكل الكلوي وغيرها من الأشكال .
زياده تصبغ الكروماتين وتوزيعها غير منتظم وتضاعف الكرموسومات وتجزئها مما يعطي للخلية المظهر المعتم
كما في الشكل ( 29 – A )
زيادة كثافة الغلاف النووي
زيادة الإنقسامات الخلويه الطبيعية وغير الطبيعية
يصبح لون السيتوبلازم للخلايا مزرق كما في الشكل ( 30-A ) مع زيادة إفرازاته
زيادة عدد الريبوسومات وزيادة سماكة الغلاف الخلوي
Microscopieally
It is composed of anaplastie small darkly staihing cells , the cells are anerged in nesth and casds and single – file pathesn ; such cells invade the sumounding fat tissue . and stroma , such cell No can be seen in lymph node ( % ) path Diog : Infiderating lohulat corcinoma .
A- Cancirno c- vessele
B- lymphocyye D- Connective tissue
#أمين_أحمد_ثابت (هاشتاغ)
الحوار المتمدن مشروع
تطوعي مستقل يسعى لنشر قيم الحرية، العدالة الاجتماعية، والمساواة في العالم
العربي. ولضمان استمراره واستقلاليته، يعتمد بشكل كامل على دعمكم.
ساهم/ي معنا! بدعمكم بمبلغ 10 دولارات سنويًا أو أكثر حسب إمكانياتكم، تساهمون في
استمرار هذا المنبر الحر والمستقل، ليبقى صوتًا قويًا للفكر اليساري والتقدمي،
انقر هنا للاطلاع على معلومات التحويل والمشاركة
في دعم هذا المشروع.
كيف تدعم-ين الحوار المتمدن واليسار والعلمانية
على الانترنت؟
|
ارسل هذا الموضوع الى صديق
|
حفظ - ورد
|
بحث
|
إضافة إلى المفضلة
|
للاتصال بالكاتب-ة
اليوتيوب
لينكدإن
تيلكرام
تمبلر
بلوكر
الموبايل
